|
Жибурт Е.Б., Голубева А.В. Новый гемотрансмиссивный вирус
// Гематология и трансфузиология.- 2000.- №5.- С.33
Несмотря на совершенствование инфекционной безопасности гемокомпонентной терапии, невозможно полностью исключить
риск передачи инфекционных агентов с компонентами и препаратами крови . В отношении каждого вновь открываемого
инфекционного агента необходимо как можно быстрее выяснить возможность передачи при гемотрансфузии, степень
патогенности, возможность персистенции, распространенность, диагностические исследования, пригодные для скрининга
.
Развитие методов молекулярной биологии, таких как иммуноскрининг библиотек нуклеиновых кислот, репрезентативная
дифференциальная амплификация и др., привели к упрощению идентификации новых (еmerging) вирусов.
За последние несколько лет перечень вирусов, которые находятся в крови и, возможно, значимы для трансфузионной
медицины, пополнился вирусом герпеса человека VIII типа, вирусом гепатита G, ретровирусом, ассоциированным с
рассеянным склерозом. Точка на этом, по-видимому, далеко не поставлена.
Еще один новый вирус был обнаружен в 1997 г. в сыворотке пациента с инициалами Т. Т., страдавшего гепатитом
неизвестной этиологии. Инициалы пациента определили название - вирус ТТ (ВТТ).
Установлено, что безоболочечный ВТТ содержит однонитевую спиральную круговую ДНК (около 3800 нуклеотидов) и,
по-видимому, является членом нового семейства вирусов гепатита - Сircinoviridae. Так как и в дальнейшем вирус был
обнаружен у больных острыми и хроническими заболеваниями печени и ассоциировался с высоким уровнем АЛТ, была
определена возможность его связи с гепатитом, а также передача вируса гемотрансмиссивным путем.
Данные о распространенности ВТТ довольно разнообразны. Среди 1000 доноров Великобритании ВТТ обнаружен у 1,9%,
преимущественно в старшей возрастной группе (средний возраст 53 года) с тенденцией к учащению с возрастом.
Аналогичные данные получены в США, где ВТТ встречается у 1 % доноров и 4% пациентов, получавших трансфузии.
В Германии при обследовании доноров также выявлен 1% ВТТ-позитивных доноров. В Италии 22% доноров имеют
последовательности ВТТ в сыворотке крови, а в Бразилии - 62% . По данным японских авторов 12% доноров являются
носителями ВТТ. ВТТ широко распространен среди жителей Южной Америки, Центральной Африки, Папуа, Новой Гвинеи.
Интересно, что у 43% ВТТ-позитивных новорожденных матери были ВТТ-негативны.
ТТ-виремия характерна для 37% больных с талассемией в странах Средиземноморья и 19% больных с талассемией в
Таиланде. У больных гемофилией, получающих в качестве заместительной терапии VIII фактор, ВТТ выявляется в 44,4%
, что согласуется с данными, полученными при обследовании концентратов факторов свертывания VIII и IX, когда
обнаружили высокий процент контаминации вирусом .
Проведены обширные исследования по выявлению ВТТ у пациентов с заболеваниями печени, особенно неизвестной
этиологии. ТТ-виремия обнаружена при фульминантной форме гепатита, хроническом активном гепатите и циррозе
неизвестной этиологии. У 15% больных криптогенным циррозом печени, 27% больных идиопатической фульминантной
печеночной недостаточностью, у 19% пациентов, ожидающих ортотопической трансплантации печени, также находят ВТТ .
Разноречивы данные о связи ВТТ с гепатоцеллюлярной карциномой. Т. Уаmаmоto и соавт. выявили ВТТ у 20
неинфицированных вирусами гепатита В и С пациентов с гепатоцеллюлярной карциномой, однако отсутствие интеграции
ДНК вируса и ДНК гепатоцита авторы считают доказательством неканцерогенности ВТТ. По данным S. М.Dеsаi и соавт.,
среди больных гепатитом ВТТ выявлен у 2%. Однако по мнению Т. Nакаnо и соавт., ВТТ - не главная причина
криптогенного гепатита, так как превалирования ВТТ-инфекции в группе риска не выявлено.
При обследовании категорий населения, относящихся к группам риска (наркоманы, проститутки, гомосексуалисты), не
выявлено преобладания инфицированности (4,5-13%) по сравнению с популяционной. Хотя в эксперименте (шимпанзе) при
внутривенном введении ВТТ развивается виремия, полагают, что распространение вируса половым путем и при
внутривенном введении наркотиков не является преобладающим.
ДНК ВТТ выявляют с помощью метода полимеразной цепной реакции (ПЦР). Разработан метод определения антител к ВТТ
(анти-ВТТ) в реакции иммунопреципитации.
Анти-ВТТ обнаружены у 1 (17%) из 6 здоровых доноров с ДНК ВТТ в крови и у 11 (29%) из 38 без ВТТ-вирусемии. У 2
пациентов с посттрансфузионным ни А ни G гепатитом анти-ВТТ появились в сыворотке крови после исчезновения из нее
вируса. Помимо циркулирующей в плазме крови, ДНК ВТТ выявлена также и в лейкоцитах. Т. Каndа и соавт. обнаружили,
что 60% лиц, перенесших трансплантацию костного мозга, инфицированы ВТТ, тогда как среди доноров костного мозга
ВТТ-позитивны лишь 10%. Полагают, что ВТТ реплицируется в основном в гемопоэтических клетках и не является
причиной повреждения гепатоцитов. Даже при высоком уровне трансаминаз крови не всегда удается обнаружить
повреждения ткани печени при моно-ВТТ-инфекции.
Выделено 6 генотипов (G1 -6) ВТТ, при этом не определено каких-либо географических различий между генотипами
вируса. Наиболее распространены генотипы G1-3 . Генотип 1а и 2а чаще встречается при заболеваниях печени. О
наличии персистирующей инфекции можно узнать, производя тестирование через 5-6 мес. после трансфузии крови, ее
компонентов и препаратов. В то же время развитие фульминантного поражения печени возможно уже через месяц после
предполагаемого инфицирования. Необходимы дальнейшие исследования и данные, на основании которых можно более
детально прояснить этиопатогенетическую роль ВТТ .
Первоначально вирус был определен как гемотрансмиссивный. Однако выявление широкого бессимптомного носительства у
здоровых людей, никогда не получавших трансфузий крови, и у детей поставило под сомнение исключительность
парентерального пути передачи инфекции. Установлено, что вирус экскретируется желчью, выделяется из
желудочно-кишечного тракта и передается фекально-оральным путем. С другой стороны, относительно низкая
встречаемость ВТТ-инфекции в группах риска свидетельствует, что половой и инъекционный пути передачи не являются
основными .
Так как ВТТ относится к безоболочечным вирусам, возникает проблема его элиминации из препаратов крови. При
скрининговом контроле препаратов факторов VIII и IX ДНК ВТТ обнаружена в 56% исследуемых образцов. За рубежом
внедрены в практику и интенсивно развиваются технологии инактивации вирусов в плазме и продуктах ее переработки:
метод растворитель/детергент (Sо1vеnt/Dеtergent,SD) и фотохимическая модификация с метиленовым синим(methylene
blue, MB).Метод SD лицензирован для обработки концентратов факторов свертывания в США в 1985 г. Суть его
заключается в инкубации пулов плазмы с органическим растворителем три(n-бутил)фосфат (ТNВР) и детергентом тритон
X-100. При SD -обработке разрывается оболочка вирусов, содержащая липиды, и инфекционность вирусов (ВИЧ, вирусы
гепатита В и С и др.) утрачивается.
Безопасность таких продуктов обеспечивается, с одной стороны, за счет
элиминации покрытых оболочкой вирусов, а с другой - за счет сохранения в пуле нейтрализующих антител к вирусу
гепатита А и парвовирусу В 19 - двум безоболочечным гемотрансмиссивным вирусам. Однако в отношении
безоболочечного ВТТ это положение еще предстоит уточнить. Также интересно оценить действие на ВТТ метода
фотохимической модификации с МВ, который нацелен на другую мишень - ядро вируса. За счет положительного заряда
молекула красителя связывается с нуклеиновыми кислотами, особенно в местах гуаниновых оснований, а также с
белками вирусного ядра. Синглетный кислород, образующийся при облучении, и является действующим фактором процесса
фотоокислительной (натриевые лампы с максимумом эмиссии 590 нм) инактивации вирусов. В связи с этим метод
МВ-облучения эффективен в отношении всех вирусов независимо от наличия оболочки. С его использованием
обрабатываются единичные дозы плазмы. В качестве контроля отслеживают эффективность инактивации вируса
везикулярного стоматита.
По предварительным данным, разрушение ВТТ происходит при пастеризации в течение 10 ч при 60°С, и ВТТ
обнаруживается лишь у 0,5% больных гемофилией, получающих только термически обработанные концентраты факторов
свертывания. Предстоит уточнить, насколько эффективны методы обеззараживания гемокомпонентов в отношении ВТТ.
Нестандартность ПЦР-диагностики (использование различных праймеров разными учеными) позволяет усомниться в
истинности ряда публикуемых данных о распространенности ВТТ. Более того, S. М.Dеsаi и соавт., применив для
обследования одного контингента 2 праймера, использованные в предшествующих исследованиях Т. Nishizava и Р.
Simmоnds, установили, что большинство образцов реагирует только с одним из праймеров.
Таким образом, в будущих исследованиях предстоит уточнить закономерности эпидемиологии ВТТ, сведения о его
патогенности, способах диагностики и скрининга этой инфекции. Для трансфузионной медицины значимы особенности ВТТ
- множественность путей передачи и отсутствие оболочки. Однако имеющейся информации недостаточно для радикального
изменения порядка заготовки и переливания крови.
|
